Përmbajtje:

Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield: 9 hapa (me fotografi)
Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield: 9 hapa (me fotografi)

Video: Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield: 9 hapa (me fotografi)

Video: Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield: 9 hapa (me fotografi)
Video: White Blood Cells fighting under microscope! 2024, Dhjetor
Anonim
Image
Image
Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield
Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield
Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield
Mikroskopë fluoreshentë me kosto të ulët dhe Brightfield

Projektet Fusion 360 »

Mikroskopia fluoreshente është një modalitet imazhi që përdoret për të vizualizuar strukturat specifike në mostrat biologjike dhe fizike të tjera. Objektet me interes në mostër (p.sh. neuronet, enët e gjakut, mitokondri, etj.) Janë vizualizuar sepse komponimet fluoreshente i bashkëngjiten vetëm atyre strukturave të veçanta. Disa nga imazhet më të bukura të mikroskopisë mblidhen me mikroskopë fluoreshencë; shikoni këto imazhe të paraqitura në faqen e internetit të Nikon MicroscopyU për të parë disa shembuj. Mikroskopia fluoreshente është e dobishme për shumë studime të biologjisë që fokusohen në një strukturë ose lloj qelizor të veçantë. Për shembull, shumë studime kërkimore mbi neuronet në tru varen nga përdorimi i modaliteteve të mikroskopisë fluoreshente që imazhojnë në mënyrë specifike neuronet.

Në këtë udhëzues, unë do të kaloj mbi parimet themelore të mikroskopisë fluoreshente dhe si të ndërtoj tre mikroskopë të ndryshëm fluoreshencë me kosto të ulët. Këto sisteme zakonisht kushtojnë mijëra dollarë, por ka pasur përpjekje të fundit për t'i bërë ato më të gatshme. Hartimet që paraqes këtu përdorin një telefon të zgjuar, një dSLR dhe një mikroskop USB. Të gjitha këto modele gjithashtu punojnë si mikroskopë të fushës së ndritshme. Le të fillojmë!

Hapi 1: Vështrim i përgjithshëm i mikroskopisë fluoreshente

Vështrim i përgjithshëm i mikroskopisë fluoreshente
Vështrim i përgjithshëm i mikroskopisë fluoreshente
Vështrim i përgjithshëm i mikroskopisë fluoreshente
Vështrim i përgjithshëm i mikroskopisë fluoreshente

Për të kuptuar idenë themelore të mikroskopisë fluoreshente, imagjinoni një pyll të dendur gjatë natës të mbushur me pemë, kafshë, shkurre dhe gjithçka tjetër që jeton në një pyll. Nëse ndizni një elektrik dore në pyll, shihni të gjitha këto struktura dhe mund të jetë e vështirë të vizualizoni një kafshë ose bimë të veçantë. Le të themi se ju jeni interesuar vetëm për të parë shkurre boronica në pyll. Për ta arritur këtë, ju i stërvitni zjarrfikësit që të tërhiqen vetëm nga shkurret e boronicës, në mënyrë që vetëm shkurret e boronicës të ndriçojnë kur shikoni në pyll. Ju mund të thoni që i keni etiketuar shkurret e boronicës me zjarrfikëset në mënyrë që të mund të përfytyroni vetëm strukturat e boronicës në pyll.

Në këtë analog, pylli përfaqëson të gjithë mostrën, shkurret e boronicës përfaqësojnë strukturën që dëshironi të vizualizoni (p.sh. një qelizë specifike ose organele nënqelizore), dhe zjarrfikësit janë përbërje fluoreshente. Rasti në të cilin ndriçoni elektrik dore vetëm pa xixëllonjat është analog me mikroskopinë e fushës së ndritshme.

Hapi tjetër është të kuptuarit e funksionit bazë të komponimeve fluoreshente (të quajtura edhe fluorofore). Fluoroforet janë vërtet objekte të vogla (në shkallën e nanometrave) të krijuara për t'u bashkuar me struktura të veçanta në mostër. Ata thithin dritë në një gamë të ngushtë të gjatësisë së valës dhe ri-emetojnë një gjatësi vale tjetër të dritës. Për shembull, një fluorofor mund të thithë dritën blu (domethënë fluorofori ngacmohet nga drita blu) dhe pastaj të lëshojë përsëri dritë jeshile. Zakonisht kjo përmblidhet nga një spektër ngacmimi dhe emetimi (foto më sipër). Këto grafikë tregojnë gjatësinë e valës së dritës që thith fluorofori dhe gjatësinë e valës së dritës që lëshon fluorofori.

Dizajni i mikroskopit është shumë i ngjashëm me një mikroskop normal të fushës së ndritshme me dy dallime të mëdha. Së pari, drita për të ndriçuar mostrën duhet të jetë gjatësia e valës që eksiton fluoroforin (për shembullin e mësipërm, drita ishte blu). Së dyti, mikroskopi duhet të mbledhë vetëm dritën e emetimit (dritën jeshile), ndërsa bllokon ngjyrën blu. Kjo ndodh sepse drita blu shkon kudo, por drita jeshile vjen vetëm nga strukturat specifike në mostër. Për të bllokuar dritën blu, mikroskopi zakonisht ka diçka të quajtur filtër me kalim të gjatë që lejon që drita jeshile të kalojë pa dritë blu. Çdo filtër me kalim të gjatë ka një gjatësi vale ndërprerëse. Nëse drita ka një gjatësi vale më të gjatë se ndërprerja, atëherë mund të kalojë nëpër filtër. Prandaj emri, "kalim i gjatë". Gjatësia më e shkurtër e valës është e bllokuar.

Këtu janë disa përmbledhje të mikroskopisë fluoreshente:

bitesizebio.com/33529/fluorescence-microsc…

www.microscopyu.com/techniques/fluorescenc…

www.youtube.com/watch?v=PCJ13LjncMc

Hapi 2: Modelimi i mikroskopëve me optikë Ray

Modelimi i mikroskopëve me rreze optike
Modelimi i mikroskopëve me rreze optike
Modelimi i mikroskopëve me optikë Ray
Modelimi i mikroskopëve me optikë Ray

Nënkampion në Konkursin e Optikës

Recommended: